sắc ký, còn được gọi là "phân tích sắc ký", "sắc ký", là một phương pháp phân tách và phân tích, có ứng dụng rất rộng trong hóa học phân tích, hóa học hữu cơ, hóa sinh và các lĩnh vực khác.
Người sáng lập ra sắc ký là nhà thực vật học người Nga M.Tsvetter.Năm 1906, nhà thực vật học người Nga Zvetter đã công bố kết quả thí nghiệm của mình: Để tách sắc tố thực vật, ông đổ chiết xuất ete dầu mỏ có chứa sắc tố thực vật vào ống thủy tinh chứa bột canxi cacbonat và rửa giải bằng ete dầu mỏ từ trên xuống dưới.Bởi vì các sắc tố khác nhau có khả năng hấp phụ khác nhau trên bề mặt của các hạt canxi cacbonat, trong quá trình lọc, các sắc tố khác nhau di chuyển xuống với tốc độ khác nhau, do đó tạo thành các dải màu khác nhau.Các thành phần sắc tố được tách ra.Ông đặt tên cho phương pháp tách này là sắc ký.
Sơ đồ biểu diễn thí nghiệm tách sắc tố lá cây
Với sự phát triển không ngừng của các phương pháp phân tách, ngày càng có nhiều chất không màu trở thành đối tượng của quá trình phân tách, sắc ký cũng dần mất đi ý nghĩa của “màu sắc”, nhưng cái tên này vẫn được sử dụng cho đến ngày nay.
Phân loại sắc ký
Bản chất của sắc ký là một quá trình trong đó các phân tử cần tách được phân chia và cân bằng giữa pha tĩnh và pha động.Các chất khác nhau được phân chia khác nhau giữa hai pha, khiến chúng chuyển động với tốc độ khác nhau trong pha động.Với sự chuyển động của pha động, các thành phần khác nhau trong hỗn hợp được tách ra khỏi pha tĩnh.Tùy thuộc vào cơ chế, nó có thể được chia thành nhiều loại khác nhau.
1, theo phân loại trạng thái vật lý hai pha
Pha động: Sắc ký khí, sắc ký lỏng, sắc ký lỏng siêu tới hạn
Pha tĩnh: khí-rắn, khí-lỏng;Lỏng-rắn, lỏng-lỏng
2, theo hình thức phân loại pha tĩnh
Sắc ký cột: sắc ký cột nhồi, sắc ký cột mao quản, sắc ký cột vi mô, sắc ký chuẩn bị
Sắc ký phẳng: sắc ký giấy, sắc ký lớp mỏng, sắc ký màng polyme
3, phân loại theo cơ chế tách
Sắc ký hấp phụ: Các thành phần khác nhau được tách theo khả năng hấp phụ và giải hấp của chúng trên chất hấp phụ
Sắc ký phân vùng: Các thành phần khác nhau được tách theo độ hòa tan của chúng trong dung môi
Sắc ký loại trừ phân tử: theo kích thước phân tử của sắc ký trao đổi ion tách: các thành phần khác nhau của ái lực để tách nhựa trao đổi ion
Sắc ký ái lực: Phân tách bằng cách sử dụng ái lực đặc hiệu giữa các đại phân tử sinh học
Điện di mao quản: các thành phần được phân tách theo sự khác biệt về tính di động và/hoặc hành vi phân chia
Sắc ký chirus được sử dụng để tách và phân tích các loại thuốc chirus, có thể được chia thành ba loại: phương pháp thuốc thử tạo dẫn xuất chirus;Phương pháp phụ gia pha động Chirus;Phương pháp phân giải pha tĩnh Chirus
Thuật ngữ cơ bản về sắc ký
Các đường cong thu được bằng cách vẽ các tín hiệu đáp ứng của các thành phần sau khi phát hiện sự phân tách sắc ký theo thời gian được gọi là sắc ký đồ.
Đường cơ sở:Trong các điều kiện sắc ký nhất định, đường cong của tín hiệu được tạo ra khi chỉ có pha động đi qua hệ thống máy dò được gọi là đường cơ sở, như thể hiện trong đường ot.Khi điều kiện thí nghiệm ổn định, đường cơ sở là đường thẳng song song với trục hoành.Đường cơ sở phản ánh tiếng ồn của thiết bị, chủ yếu là của máy dò, theo thời gian.
Chiều cao đỉnh:khoảng cách thẳng đứng giữa điểm pic sắc ký và đường cơ sở, ký hiệu là h, như thể hiện trên đường AB'.
Chiều rộng vùng:Độ rộng vùng của pic sắc ký có liên quan trực tiếp đến hiệu suất tách.Có ba phương pháp để mô tả độ rộng pic sắc ký: độ lệch chuẩn σ, độ rộng pic W và FWHM W1/2.
Độ lệch chuẩn (σ):σ là một nửa khoảng cách giữa hai điểm uốn trên đường cong phân bố chuẩn, giá trị σ biểu thị mức độ phân tán của các thành phần ra xa cột.Giá trị σ càng lớn thì các thành phần nước thải càng phân tán và hiệu quả phân tách càng kém.Ngược lại, các thành phần nước thải được cô đặc và hiệu quả phân tách tốt.
Độ rộng cực đại W:Các điểm giao nhau ở cả hai phía của pic sắc ký được sử dụng làm đường tiếp tuyến và điểm chặn trên đường cơ sở được gọi là chiều rộng pic hoặc chiều rộng đường cơ sở, cũng có thể được biểu thị bằng W, như trong Hình IJ.Theo nguyên lý phân phối chuẩn, mối quan hệ giữa độ rộng đỉnh và độ lệch chuẩn có thể được chứng minh là W=4σ.
W1/2:Độ rộng cực đại ở một nửa chiều cao cực đại được gọi là FWHM, như được hiển thị cho khoảng cách GH.W1/2=2,355σ, W=1,699W1/2.
W1/2, W đều bắt nguồn từ σ và được sử dụng để tính diện tích pic ngoài việc đo hiệu ứng cột.Phép đo FWHM thuận tiện hơn và được sử dụng phổ biến nhất.
bản tóm tắt ngắn gọn
Từ đường cong dòng chảy ra cực đại sắc ký, có thể đạt được các mục tiêu sau:
a, Phân tích định tính được thực hiện dựa trên giá trị lưu giữ của các pic sắc ký
b, phân tích định lượng dựa trên diện tích hoặc pic của pic sắc ký
C. Hiệu suất tách của cột được đánh giá theo giá trị lưu giữ và độ rộng pic của pic sắc ký
Công thức tính toán liên quan đến sắc ký
1. Giá trị lưu giữ
Giá trị lưu giữ là một tham số được sử dụng để mô tả mức độ thành phần mẫu được giữ lại trong cột và được sử dụng làm chỉ báo về đặc tính sắc ký.Phương pháp biểu diễn của nó như sau:
Thời gian lưu tr
Thời điểm chếttM
Điều chỉnh thời gian lưu tR'=tR-tM
(Tổng thời gian ở pha tĩnh)
Khối lượng lưu giữ
VR=tR*F.(không phụ thuộc vào vận tốc pha động)
Khối lượng chết
VM=tM*Fc
(Không gian không bị chiếm bởi pha tĩnh trong đường dẫn dòng từ bộ phun đến đầu dò)
Điều chỉnh âm lượng lưu giữ VR'=t'R*Fc
2. Giá trị lưu giữ tương đối
Giá trị lưu giữ tương đối, còn được gọi là hệ số tách, tỷ lệ hệ số phân chia hoặc hệ số dung lượng tương đối, là tỷ lệ giữa thời gian lưu (thể tích) đã điều chỉnh của thành phần được kiểm tra với thời gian lưu (thể tích) đã điều chỉnh của chuẩn trong các điều kiện sắc ký nhất định.
Các giá trị lưu giữ tương đối được sử dụng để loại bỏ ảnh hưởng của các điều kiện vận hành nhất định, chẳng hạn như tốc độ dòng chảy và tổn thất cố định, lên các giá trị lưu giữ.Chất chuẩn trong giá trị lưu giữ tương đối có thể là một thành phần trong mẫu thử hoặc một hợp chất được thêm vào một cách nhân tạo.
3. Chỉ số lưu giữ
Chỉ số lưu giữ là chỉ số lưu giữ của chất i cần thử trong dung dịch cố định X. Hai n-alanes được chọn làm chất đối chứng, một chất có số cacbon N và chất còn lại có số N+n.Thời gian lưu được điều chỉnh của chúng lần lượt là t 'r (N) và t 'r (N+n), sao cho thời gian lưu được điều chỉnh t 'r (i) của chất i được thử nằm chính xác giữa chúng, nghĩa là, t'r (N).
Chỉ số duy trì có thể được tính như sau.
4. Hệ số công suất (k)
Ở trạng thái cân bằng, tỷ lệ khối lượng của một thành phần trong (các) pha tĩnh và pha động (m), được gọi là hệ số công suất.Công thức như sau:
5、Hệ số phân chia (K) Ở trạng thái cân bằng, tỷ lệ giữa nồng độ của một thành phần trong (các) pha tĩnh và pha động (m), gọi là hệ số phân chia.Công thức như sau
Mối quan hệ giữa K và k:
Nó phản ánh kiểu cột và nút thắt của nó thuộc tính quan trọng của cấu trúc
bản tóm tắt ngắn gọn
Mối quan hệ giữa giá trị lưu giữ với hệ số dung lượng và hệ số phân chia:
Việc phân tách sắc ký dựa trên sự khác biệt về khả năng hấp phụ hoặc hòa tan của từng thành phần trong một mẫu tương đối cố định, có thể biểu thị định lượng bằng kích thước của giá trị hệ số phân chia K (hoặc hệ số công suất k).
Các thành phần có khả năng hấp phụ hoặc hòa tan mạnh có hệ số phân chia (hoặc hệ số dung lượng) lớn và thời gian lưu giữ lâu.Ngược lại, các thành phần có khả năng hấp phụ hoặc hòa tan yếu có hệ số phân chia nhỏ và thời gian lưu giữ ngắn.
Lý thuyết cơ bản về sắc ký
1. Lý thuyết mâm
(1) Đưa ra - lý thuyết nhiệt động lực học
Nó bắt đầu với mô hình tấm tháp do Martin và Synge đề xuất.
Cột phân đoạn: trong khay nhiều lần cân bằng khí-lỏng, theo điểm sôi của sự phân tách khác nhau.
Cột: Các thành phần được cân bằng bằng nhiều vách ngăn giữa hai pha và được phân chia theo các hệ số phân chia khác nhau.
(2) Giả thuyết
(1) Có nhiều khay trong cột và các thành phần có thể nhanh chóng đạt đến trạng thái cân bằng phân bố trong khoảng khay (nghĩa là chiều cao của khay).
(2) Pha động đi vào cột, không liên tục mà dao động, nghĩa là mỗi đoạn là một thể tích cột.
(3) Khi mẫu được thêm vào mỗi tấm cột, sự khuếch tán của mẫu dọc theo trục cột có thể bị bỏ qua.
(4) Hệ số phân vùng bằng nhau trên tất cả các khay, không phụ thuộc vào số lượng linh kiện.Tức là hệ số phân vùng không đổi trên mỗi taban.
(3) Nguyên tắc
Sơ đồ lý thuyết khay
Nếu một thành phần có khối lượng đơn vị, cụ thể là m=1 (ví dụ: 1mg hoặc 1μg), được thêm vào khay số 0 và sau khi phân phối cân bằng, vì k=1, cụ thể là ns=nm, nm=ns=0,5.
Khi một thể tích tấm (lΔV) của khí mang đi vào tấm 0 dưới dạng xung, khí mang chứa thành phần nm trong pha khí được đẩy lên tấm 1. Lúc này, thành phần ns trong pha lỏng của tấm 0 và thành phần nm trong pha khí của tấm 1 sẽ được phân bố lại giữa hai pha.Do đó, tổng lượng thành phần chứa ở tấm 0 là 0,5, trong đó pha khí và pha lỏng mỗi pha là 0,25, tổng lượng thành phần chứa ở tấm 1 cũng là 0,5.Pha khí và pha lỏng cũng là 0,25.
Quá trình này được lặp lại mỗi khi một lượng khí mang thể tích tấm mới được đưa vào cột (xem bảng bên dưới).
(4) Phương trình đường cong dòng chảy ra sắc ký
σ là độ lệch chuẩn, là thời gian lưu, C là nồng độ tại thời điểm bất kỳ,
C, là nồng độ tiêm, nghĩa là tổng lượng thành phần (diện tích pic A).
(5) thông số hiệu suất cột
Ở hằng số tR, W hoặc w 1/2 càng nhỏ (tức là đỉnh càng hẹp), số lượng đĩa lý thuyết n càng lớn thì chiều cao đĩa lý thuyết càng nhỏ và hiệu suất tách của cột càng cao.Điều này cũng đúng với khay lý thuyết hiệu quả.Vì vậy, số khay theo lý thuyết là một chỉ số để đánh giá hiệu quả của cột.
(5) Đặc điểm và khuyết điểm
> Ưu điểm
Lý thuyết khay mang tính bán thực nghiệm và giải thích hình dạng của đường cong dòng chảy ra
Quá trình phân chia, tách biệt các thành phần được minh họa
Một chỉ số đánh giá hiệu quả của cột được đề xuất
> Hạn chế
Các thành phần thực sự không thể đạt đến trạng thái cân bằng phân phối trong hai giai đoạn:
Không thể bỏ qua sự khuếch tán theo chiều dọc của các thành phần trong cột:
Ảnh hưởng của các yếu tố động học khác nhau đến quá trình chuyển khối không được xem xét.
Mối quan hệ giữa hiệu ứng cột và tốc độ dòng của pha động không thể được giải thích:
Không rõ yếu tố chính nào ảnh hưởng đến hiệu ứng cột
Những vấn đề này được giải quyết thỏa đáng trong lý thuyết tỷ lệ.
2. Lý thuyết tỷ giá
Năm 1956, học giả người Hà Lan VanDeemter et al.tiếp thu khái niệm lý thuyết khay, đồng thời kết hợp các yếu tố động học ảnh hưởng đến chiều cao của khay, đưa ra lý thuyết động học của quá trình sắc ký - lý thuyết tốc độ và rút ra phương trình VanDeemter.Nó coi quá trình sắc ký là một quá trình không cân bằng động và nghiên cứu ảnh hưởng của các yếu tố động học đến việc mở rộng cực đại (tức là hiệu ứng cột).
Sau đó, Giddings và Snyder et al.đề xuất phương trình tốc độ sắc ký lỏng (cụ thể là phương trình Giddings) dựa trên phương trình VanDeemter (sau này gọi là phương trình tốc độ sắc ký khí) và theo sự khác biệt tính chất giữa chất lỏng và khí.
(1) Phương trình Van Deemter
Trong đó: H: là chiều cao của tấm ván
A: hệ số khuếch tán xoáy
B: hệ số khuếch tán phân tử
C: hệ số điện trở chuyển khối
(2) Phương trình Gidding
Phân tích định lượng và định tính
(1) Phân tích định tính
Phân tích sắc ký định tính là để xác định các hợp chất được biểu thị bằng mỗi pic sắc ký.Vì các chất khác nhau có giá trị lưu giữ xác định trong các điều kiện sắc ký nhất định nên giá trị lưu giữ có thể được sử dụng làm chỉ số định tính.Các phương pháp sắc ký định tính khác nhau hiện đang dựa trên giá trị lưu giữ.
Tuy nhiên, các chất khác nhau có thể có giá trị lưu giữ tương tự hoặc giống hệt nhau trong cùng điều kiện sắc ký, nghĩa là các giá trị lưu giữ không phải là duy nhất.Do đó, rất khó để mô tả một mẫu hoàn toàn chưa biết chỉ dựa trên các giá trị lưu giữ.Nếu trên cơ sở hiểu biết về nguồn gốc, bản chất và mục đích của mẫu, có thể đưa ra đánh giá sơ bộ về thành phần của mẫu và có thể sử dụng các phương pháp sau để xác định hợp chất được biểu thị bằng pic sắc ký.
1. Kiểm định chất lượng bằng chất tinh khiết
Trong những điều kiện sắc ký nhất định, chất chưa biết chỉ có thời gian lưu xác định.Do đó, chất chưa biết có thể được xác định một cách định tính bằng cách so sánh thời gian lưu của chất nguyên chất đã biết trong cùng điều kiện sắc ký với thời gian lưu của chất chưa biết.Nếu cả hai giống nhau thì chất chưa biết có thể là chất nguyên chất đã biết;Ngược lại, cái chưa biết không phải là chất tinh khiết.
Phương pháp kiểm soát chất nguyên chất chỉ áp dụng cho chất chưa biết đã biết thành phần, thành phần tương đối đơn giản và chất nguyên chất đã được biết.
2. Phương pháp giá trị lưu giữ tương đối
Giá trị lưu giữ tương đối α, đề cập đến sự điều chỉnh giữa thành phần i và vật liệu tham chiếu.
Nó chỉ thay đổi khi thay đổi nhiệt độ cố định và cột và không liên quan gì đến các điều kiện vận hành khác.
Ở pha tĩnh và nhiệt độ cột nhất định, giá trị lưu giữ đã điều chỉnh của thành phần i và chất đối chiếu s được đo tương ứng, sau đó được tính theo công thức trên.Các giá trị lưu giữ tương đối thu được có thể được so sánh về mặt chất lượng với các giá trị tương ứng trong tài liệu.
3, thêm các chất đã biết để tăng chiều cao đỉnh phương pháp
Khi có nhiều thành phần trong mẫu chưa biết, các pic sắc ký thu được quá đậm đặc để có thể dễ dàng xác định bằng phương pháp trên hoặc khi mẫu chưa biết chỉ được sử dụng để phân tích hạng mục cụ thể.
"Đầu tiên, sắc ký đồ của một mẫu chưa biết được tạo ra, sau đó thu được sắc ký đồ tiếp theo bằng cách thêm một chất đã biết vào mẫu chưa biết."Các thành phần có chiều cao pic tăng lên có thể được biết đến với các chất như vậy.
4. Giữ nguyên phương pháp định tính của chỉ số
Chỉ số lưu giữ thể hiện đặc tính lưu giữ của các chất trên chất cố định và hiện là chỉ số định tính được sử dụng rộng rãi nhất và được quốc tế công nhận trong GC.Nó có ưu điểm là độ tái lập tốt, tiêu chuẩn thống nhất và hệ số nhiệt độ nhỏ.
Chỉ số lưu giữ chỉ liên quan đến các tính chất của pha tĩnh và nhiệt độ cột chứ không liên quan đến các điều kiện thí nghiệm khác.Độ chính xác và khả năng tái tạo của nó là tuyệt vời.Miễn là nhiệt độ cột giống với nhiệt độ của pha tĩnh, giá trị tài liệu có thể được áp dụng để nhận dạng và không cần thiết phải sử dụng vật liệu nguyên chất để so sánh.
(2) Phân tích định lượng
Cơ sở định lượng bằng sắc ký:
Nhiệm vụ của phân tích định lượng là tìm ra hàng trăm thành phần có trong mẫu hỗn hợp
Nội dung phân số.Việc định lượng bằng sắc ký dựa trên những điều sau: khi các điều kiện vận hành ổn định,
Khối lượng (hoặc nồng độ) của thành phần đo được xác định bằng tín hiệu phản hồi do máy dò cung cấp
Nó tỷ lệ thuận.Cụ thể là:
Cơ sở định lượng bằng sắc ký:
Nhiệm vụ của phân tích định lượng là tìm ra hàng trăm thành phần có trong mẫu hỗn hợp
Nội dung phân số.Việc định lượng bằng sắc ký dựa trên những điều sau: khi các điều kiện vận hành ổn định,
Khối lượng (hoặc nồng độ) của thành phần đo được xác định bằng tín hiệu phản hồi do máy dò cung cấp
Nó tỷ lệ thuận.Cụ thể là:
1. Phương pháp đo diện tích pic
Diện tích pic là dữ liệu định lượng cơ bản được cung cấp bởi sắc ký đồ và độ chính xác của phép đo diện tích pic ảnh hưởng trực tiếp đến kết quả định lượng.Các phương pháp đo khác nhau được sử dụng cho các pic sắc ký có hình dạng pic khác nhau.
Rất khó để tìm ra giá trị chính xác của mùa đông trong phân tích định lượng:
Một mặt do khó đo chính xác thể tích phun tuyệt đối: mặt khác
Diện tích pic phụ thuộc vào điều kiện sắc ký và dải sắc ký phải được duy trì khi đo giá trị
Làm điều tương tự là không thể và không thuận tiện.Và thậm chí nếu bạn có thể làm đúng
Giá trị chính xác cũng vì không có tiêu chuẩn thống nhất và không thể áp dụng trực tiếp.
2. Hệ số hiệu chỉnh định lượng
Định nghĩa hệ số hiệu chỉnh định lượng: lượng linh kiện đi vào máy dò (m)
Tỷ lệ giữa diện tích pic sắc ký (A) hoặc chiều cao pic () là hằng số tỷ lệ (,
Hằng số tỷ lệ được gọi là hệ số hiệu chỉnh tuyệt đối cho thành phần.
Rất khó để tìm ra giá trị chính xác của mùa đông trong phân tích định lượng:
Một mặt do khó đo chính xác thể tích phun tuyệt đối: mặt khác
Diện tích pic phụ thuộc vào điều kiện sắc ký và dải sắc ký phải được duy trì khi đo giá trị
Làm điều tương tự là không thể và không thuận tiện.Và thậm chí nếu bạn có thể làm đúng
Giá trị chính xác cũng vì không có tiêu chuẩn thống nhất và không thể áp dụng trực tiếp.
Nghĩa là, hệ số hiệu chỉnh tương đối 'của một thành phần là thành phần đó và vật liệu tham chiếu s
Tỷ lệ của các hệ số hiệu chỉnh tuyệt đối.
Có thể thấy hệ số hiệu chỉnh tương đối là khi chất lượng của linh kiện so với tiêu chuẩn.
Khi chất s bằng nhau thì diện tích pic của vật liệu đối chiếu là diện tích pic của thành phần
Nhiều.Nếu một thành phần nào đó có khối lượng m và diện tích pic A thì số f'A
Các giá trị bằng diện tích pic của vật liệu đối chứng có khối lượng bằng.Nói cách khác,
Thông qua hệ số hiệu chỉnh tương đối, diện tích pic của mỗi thành phần có thể được tách ra
Chuyển đổi về diện tích pic của vật liệu tham chiếu bằng khối lượng của nó thì tỷ số
Tiêu chuẩn được thống nhất.Vì vậy, đây là phương pháp chuẩn hóa để tìm ra tỷ lệ phần trăm của từng thành phần
Cơ sở về số lượng.
Phương pháp lấy hệ số hiệu chỉnh tương đối: giá trị hệ số hiệu chỉnh tương đối chỉ được so sánh với
Phép đo liên quan đến tiêu chuẩn và loại máy dò, nhưng liên quan đến dải hoạt động
Nó không quan trọng.Do đó, các giá trị có thể được lấy từ các tài liệu tham khảo trong tài liệu.Nếu văn bản
Nếu bạn không thể tìm thấy giá trị mong muốn trong sản phẩm, bạn cũng có thể tự mình xác định giá trị đó.Phương pháp xác định
Phương pháp: Một lượng chất nhất định được đo mười vật liệu tham chiếu được chọn → tạo thành nồng độ nhất định
Đo diện tích pic sắc ký A và As của hai thành phần.
Đó là công thức.
3. Phương pháp tính định lượng
(1) Phương pháp chuẩn hóa diện tích
Tổng hàm lượng của tất cả các phần không có đỉnh được tính là 100% để định lượng
Phương pháp này được gọi là chuẩn hóa.Công thức tính toán của nó như sau:
Trong đó P,% là hàm lượng phần trăm của các thành phần được thử nghiệm;A1, A2... An là thành phần 1. Diện tích pic 1~n;f'1, f'2... f'n là hệ số hiệu chỉnh tương đối cho các thành phần từ 1 đến n.
(2) phương pháp tiêu chuẩn bên ngoài
Phương pháp so sánh định lượng giữa tín hiệu đáp ứng của thành phần cần kiểm tra trong mẫu và thành phần nguyên chất cần kiểm tra làm đối chứng.
(3) Phương pháp chuẩn nội
Cái gọi là phương pháp nội chuẩn là phương pháp trong đó một lượng chất nguyên chất nhất định được thêm vào dung dịch chuẩn của chất được thử và dung dịch mẫu làm chất chuẩn nội, sau đó được phân tích và xác định.
(3)phương pháp thêm chuẩn
Phương pháp thêm chuẩn hay còn gọi là phương pháp thêm nội, là thêm một lượng nhất định (△C)
Chất tham chiếu của chất thử được thêm vào dung dịch mẫu cần thử và chất thử được thêm vào xét nghiệm
Pic của dung dịch mẫu sau chất cao hơn pic của dung dịch mẫu ban đầu
Sự gia tăng diện tích (△A) được sử dụng để tính nồng độ của chất trong dung dịch mẫu
Nội dung (Cx)
Trong đó Ax là diện tích pic của chất cần đo trong mẫu ban đầu.
Thời gian đăng: 27-03-2023